Staphylococcus aureus é uma bactéria gram-positiva, podendo ser encontrada na pele e nas fossas nasais de pessoas saudáveis. Esse microrganismo também pode ocasionar diversas infecções no corpo, desde leves, como a acne, até graves, como pneumonia ou meningite. Frequentemente é encontrada como a causadora de infecções hospitalares (Brelle et al., 2016), sendo responsável por números crescentes de morbidade e mortalidade devido a sua resistência à meticilina e outros antibióticos (principalmente a penicilina e derivados) (Vega et al., 2011). 

As Proteínas Tirosina Fosforilases (PTPs) são um grupo de enzimas que quebra a ligação de fosfato com resíduos de tirosina em proteínas. Em células eucariotas, a associação desse grupo às enzimas tirosina cinases são a chave para diversas funções biológicas como a tradução de sinais, controle de crescimento, metabolismo e transformações oncogênicas (Soulat et al., 2002). Em células procariotas, essas enzimas também estão presentes, porém suas funções ainda são pouco conhecidas. Em Streptococcus pneumoniae, Escherichia coli e Sinorhizobium meliloti as PTPs poderiam participar do controle e/ou transporte de exopolissacarídeos, tendo um papel importante nas interações das bactérias com seus ambientes (células hospedeiras), bem como no processo de adesão e na resistência à imunidade do hospedeiro. São considerados fatores de virulência, desempenhando uma função essencial em muitos patógenos (Soulat et al., 2002).

Bactérias S. aureus possuem inúmeros fatores de virulência, concedendo-as a habilidade de realizar uma abrangente número de doenças infecciosas. Um dos fatores que possibilitam essa característica é a presença da Proteína Tirosina Fosforilase A (PtpA). Gannoun-Zak et al. (2018) demonstraram a  relação da PtpA com a capacidade de sobrevivência da bactéria à fagocitose. 

Sendo assim, faz-se necessário um melhor entendimento das características enzimáticas da PtpA e a busca por possíveis inibidores, possibilitando estudos sobre o desenvolvimento de novos fármacos capazes de inibir ou reduzir a ação infecciosa de S. aureus.

ObjetivosSub Clonagem do gene para Proteínas Tirosina Fosfatase A (PtpA) de S. aureus com posterior expressão de proteína recombinante; Padronizar a ligação do gene para PtpA no vetor de expressão pET-14b; Expressão e purificação da proteína recombinante PtpA de S. aureus; Estudo da cinética enzimática da proteína (Km, kcat, kcat/Km);Busca por inibidores (determinação de IC50 e perfil de inibição).