A terapia celular com células-tronco tem sido proposta como uma nova forma de terapia para tratar diversos distúrbios cerebrais. A implementação de tecnologias baseadas em células-tronco requer uma fonte prontamente disponível dessas células ou seus derivados diferenciados, bem como o estabelecimento de metodologias para seu isolamento e cultivo. Com isto em mente, o nosso principal objetivo foi otimizar um protocolo para a obtenção de uma população de células da derme capazes de gerar uma linhagem celular neural. Para isolar essas células, fragmentos de pele do couro cabeludo humano, derivados de cirurgia plástica foram digeridos com dispase. A epiderme foi removida manualmente, a derme foi fragmentada e incubada em tripsina/EDTA, em seguida foi dissociada mecanicamente sobre um filtro para passagens de células de até 70μm. As células foram então coletadas por centrifugação, lavadas, ressuspendidas em DMEM-F12 contendo 15% FBS e transferidos para frascos de cultura de 25 cm². As células foram cultivadas em condições padrão de cultura, até a confluência. Em passagens altas (10-13) o meio foi suplementado com FGF2, EGF e B27 e as culturas mantidas por mais 10 dias. Por meio de análises morfológicas e imunocitoquimicas verificou-se que as células expressam os marcadores de glia GFAP e os neuronais β-tub-III e neurofilamento. A expressão de nestina, um marcador de precursor neural, e P0 e p75-considerados marcadores de células da crista neural - também foram detectados. No meio contendo FGF2 e EGF, foram observadas duas populações celulares distintas - uma aderente, constituída por células morfologicamente distintas daquelas na condição controle, e as células que formam esferas flutuantes. Desse modo, os resultados sugerem que as células precursoras da derme possuem características de precursores neurais e células derivadas da crista neural. Este trabalho representa a etapa inicial para estudos pré-clínicos que visa um possível tratamento de doenças neurodegenerativas.