As células estromais mesenquimais (CEMs) são células multipotentes adultas que possuem potencial terapêutico bastante relevante na medicina regenerativa. Pelo grande crescimento do número de pesquisas básicas e ensaios clínicos com a terapia celular utilizando CEMs, se faz necessário a análise das características destas células e de como elas estão sendo aplicadas na clínica. Por conta disso, o objetivo deste trabalho foi adaptar e otimizar os protocolos de obtenção e criopreservação de CEMs obtidas do tecido adiposo de animais de companhia, através da análise de experimentos já realizados e da revisão da literatura. Foram analisados dados do isolamento, cultivo e expansão de CEMs de cães e gatos. Foram avaliados dados de células de três doadores caninos e dois doadores felinos. Também foi realizada a análise da taxa de proliferação de células criopreservadas e células cultivadas a fresco. Por fim, foi feita uma busca na literatura especializada para verificar os protocolos utilizados em ensaios clínicos padronizados de terapia celular com CEMs. Observou-se que a literatura veterinária carece de estudos padronizados deste tipo, então foi feita uma busca dos ensaios em humanos que pudessem contribuir para a elaboração deste trabalho. As CEMs felinas e caninas possuem características mesenquimais em comum. A taxa de proliferação entre CEMs descongeladas e cultivadas a fresco foi semelhante, porém havia poucos dados de células felinas. A revisão da literatura de ensaios clínicos revelou que, a maior parte dos artigos obteve CEMs a partir da medula óssea, dos protocolos de aplicação, a via de administração das CEMs mais utilizada foi a sistêmica e a doença mais tratada foi a esclerose múltipla. Os protocolos de obtenção e criopreservação de CEMs puderam ser otimizados e adaptados. As análises de caracterização demonstraram que as CEMs caninas e felinas se assemelham in vitro, porém mais ensaios são necessários para que isso seja verificado. A taxa de proliferação de CEMs descongeladas e cultivadas a fresco também foi semelhante, mas a ausência de alguns dados faz com que seja necessário a continuidade desta análise. A revisão da literatura demonstrou que os ensaios clínicos estão se tornando cada vez mais padronizados, otimizando o potencial das CEMs, tendência que pode ser transposta para a medicina veterinária.