Introdução: Neisseria gonorrhoeae (NG) é uma bactéria patogênica que infecta as mucosas humanas, causando a gonorreia, uma infecção sexualmente transmissível que causa uretrite em homens e cervicite em mulheres. NG conseguiu se adaptar e se proteger da ação dos antimicrobianos, adquirindo resistência e assim levantando a possibilidade de se tornar uma infecção intratável. Objetivo: Analisar a viabilidade celular do gonococo em diferentes condições de armazenamento e meios de transporte. Metodologia: A partir do cultivo de cepas congeladas foram preparadas suspensões bacterianas, que foram congeladas em -20°C e -80°C. A cada 30 dias, durante 6 meses, as cepas foram cultivadas em meio de cultura adequado e a leitura foi realizada após 24 horas para acompanhamento da viabilidade. Para a análise dos meios de transporte, preparou-se uma suspensão bacteriana para cada cepa e os swabs de cada meio foram introduzidos na suspensão e em seguida armazenados em temperatura ambiente. Os meios foram analisados através de cultivo em meio de cultura. As cepas armazenadas em -80°C se mantiveram viáveis por todo o período analisado, mas apenas 53% das cepas armazenadas em -20°C na concentração 1 McFarland estavam viávei. Após 60 dias, nenhuma cepa armazenada nessa temperatura estava viável. Os meios mantiveram as cepas viáveis por 24 e 72 horas. Conclusão: O armazenamento de isolados de gonococo em temperatura de -20°C não garante a viabilidade após 30 dias, mas a concentração bacteriana no caldo de armazenamento parece influenciar na sobrevivência ao longo do tempo de armazenamento. Estabelecer as condições necessárias para manter a viabilidade celular de N. gonorrhoeae durante todas as etapas dos estudos de vigilância é muito importante para minimizar custos e perdas de isolados que poderiam ser incluídos nos estudos.