O Trypanosoma cruzi é o agente etiológico da doença de Chagas e possui um ciclo de vida compreendendo um hospedeiro mamífero e um invertebrado. Para estabelecer a infecção e manter o seu metabolismo, o T. cruzi precisa estabilizar os níveis de espécies reativas de oxigênio e de nitrogênio provenientes do sistema imune de seus hospedeiros, bem como produzidos de forma intrínseca. Para isso, o T. cruzi possui um sistema antioxidante exclusivo baseado na tripanotiona, um tiol formado por duas glutationas e uma espermidina, que é sintetizado por uma reação de duas etapas, ambas catalisadas pela enzima tripanotiona sintetase (TryS). Em estudos do nosso grupo de pesquisa, foi verificada a presença de outras duas sequências anotadas como TryS, porém elas não possuem o domínio de síntese, apenas o domínio CHAP, dessa forma, foram renomeadas como TcChap1 e TcChap2. A TcChap1 difere da TryS por ser menor e possuir endereçamento para mitocôndria. Assim, o objetivo deste trabalho é caracterizar funcionalmente da proteína CHAP1 de T. cruzi. Foi construído um plasmídeo com o intuito de fazer a superexpressão da TcCHAP1 no parasito. Este plasmídeo foi usado na transfecção de T. cruzi e após seleção de uma população homogênea, os parasitos mutantes foram desafiados com peróxido de hidrogênio. Os parasitos superexpressando TcCHAP1 não apresentaram diferenças morfológicas nem alteração na capacidade de sobreviver ao estresse oxidativo promovido pela exposição ao peróxido quando comparados com os parasitos selvagens. Desta forma, a proteína TcCHAP1 não parece estar envolvida no metabolismo redox extrínseco. Também foi realizada uma tentativa de deleção do gene que codifica para TcCHAP1. A estratégia incluiu o desenho dos iniciadores necessários para a construção dos sgRNAs e os templates de reparo para TcCHAP1, assim como a transfecção do mix de deleção. Os parasitos passaram por processo de seleção por antibióticos, porém não foi possível observar a deleção do gene.